Question

Demostracion de la actividad enzimatica y determinacion de la actividad especifica

Answer 1

Se determino la actividad enzimática de la catalasa en una muestra de sangre fresca, variando condiciones de pH (tres niveles: 4.96, 6.94 y 9.04) y de concentración de sustrato (siete niveles: 0.0042, 0.0083, 0.0166, 0.0332, 0.0415, 0.0498 y 0.0664 M), titulando con permanganato de potasio el peróxido de hidrogeno remanente. Se encontró diferencia significativa entre ambas variables (pH y concentración de sustrato). Se encontró que a mayor concentración de sustrato (en el intervalo de concentraciones manejadas), el efecto en la velocidad era positivo; entre pH 6.94 y 9.04 se encontró mayor efecto en la velocidad, el pH 4.96 se mantuvo debajo de ambos niveles. Se trato la enzima como si ésta se ajustara a un perfil de Michaelis-Menten y se estimaron los parámetros cinéticos usando ajustes lineales ponderados por el arreglo de Lineweaver-Burk y Hanes. Se encontró que la catalasa no se ajusta a un perfil Michaelis-Menten, por ello es necesario estimar los parámetros con el patrón adecuado.