Mujer de 54 años, que acude con las siguientes lecturas de absorbancia: Estándar = 0.240, Muestra preprandial = 0.446 y muestra postprandial = 0.523. Interprete y de una explicación bioquímica.
Respuestas
Respuesta:
PRÁCTICA #1: ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS
PLASMÁTICAS
PRÁCTICA #3: DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE
GLUCOSA Y VALORACIÓN CLINICA
PRÁCTICA #4: CUANTIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN
DE PROTEÍNAS MEDIANTE INMUNOTRANSFERENCIA
(WESTERN BLOT)
PRACTICA # ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
1.1. FUNDAMENTO
La electroforesis es una técnica muy empleada para la separación de proteínas en función, entre
otros factores, de su carga eléctrica. Las proteínas, moléculas anfóteras, adquieren en medio básico
una carga global negativa que hace que migren del cátodo hacia el ánodo. En particular, la
electroforesis sobre membranas de acetato de celulosa es la más empleada en los análisis rutinarios
de proteínas en líquidos biológicos, como las realizadas con fines diagnósticos en sangre y orina. Sus
ventajas principales son la reproducibilidad y la sencillez. Su resolución, sin embargo es menor que
la obtenida con otras técnicas electroforéticas.
A partir del plasma sanguineo se obtienen habitualmente 5 fracciones :
- Albúmina
- 1 globulinas
- 2 globulinas
- globulinas
- globulinas
Una vez obtenida la separación de distintos tipos de fracciones proteicas, se mide la cantidad de
colorante que se combina con cada una de ellas, una vez que se ha eliminado la coloración de fondo.
En el aparato de medida (densitómetro) se hace pasar a través de la tira una radiación luminosa,
cuya intensidad se mide en una fotocélula, después de atravesar la tira. La absorción de radiación es
proporcional al grosor o densidad de las bandas y, por tanto, a la concentración de proteínas en
plasma.
1.2. MATERIALES
Soporte
Tiras de Acetato de celulosa (2,5 x 17 cm), que se conservan en disolución de metanol al 30% en
agua desionizada.
Reactivos
Tampón de electroforesis (Tris- hipurato, pH 8,8)
Colorante Rojo Ponceau
Decolorante (acido acético 10%- etanol 45%)
Transparentador (ac. acético 18%- etanol 82%). Preparar en el momento.
• Tartrato Sódico-Potásico: Na K C4H4O6.H2O