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La Fundación de Guayaquil ha sido un proceso de conquista de España, en la presente zona litoral de Ecuador, con lo que, luego de diversos traslados y conflictos con habitantes originarios de civilizaciones precolombinas, quedó de manera definitiva implantada la metrópoli de Santiago de Guayaquil. Almagro fundó la urbe de Santiago de Quito el 15 de agosto de 1534, alrededor de la presente ciudad de Riobamba en Ecuador. Tras las negociaciones entre Almagro y Alvarado, la metrópoli de Santiago tuvo que ser trasladada a otro lugar, debido a que no cumplía con los requisitos impuestos por el monarca española en la Real Cédula expedida el 4 de mayo de ese año, con lo que se denominó la salida de 2 expediciones.
La primera expedición tomó rumbo norte y fundó la villa de San Francisco de Quito el 6 de diciembre de aquel mismo año por Sebastián de Belalcázar. Belalcázar agrupó a diversos hombres y provisiones para zarpar vía marítima al golfo de Guayaquil y remontar el flujo de agua Guayas para transportar la localidad de Santiago de esta zona.