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PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran
comercializados; normalmente bajo la forma de liofilizados a los que es
preciso rehidratar. En estos casos la preparación del medio de cultivo se
reduce sencillamente a pesar la cantidad deseada del mismo y disolverla en
agua destilada siguiendo las instrucciones del fabricante. Las sustancias
termolábiles, se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los
componentes después de que estos hayan sido previamente esterilizados en
el autoclave y enfriados a temperatura ambiente ó a 40-50ºC si se trata de
medios con agar.
Antes de su esterilización los medios líquidos se reparten en los recipientes
adecuados (tubos, matraces, etc.). Si es un medio sólido y se ha de
distribuir en tubos ó en matraces será necesario fundir el agar en baño
Maria u horno microondas, una vez fundido y homogenizado, se distribuye
en caliente a los tubos ó matraces (no en placas Petri) se tapa y se esteriliza
en el autoclave.
Una vez finalizada la esterilización los medios se dejaran enfriar a
temperatura ambiente y en el caso de medios sólidos contenidos en tubos
deberán, en su caso, inclinarse para que al solidificarse adopten la forma de
agar inclinado ó pico de flauta(slant) si tal es su finalidad.
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Las placas de Petri se preparan vertiendo el medio fundido y estéril dentro
de ellas y en un ambiente aséptico (por ejemplo en la proximidad de la
llama de un mechero Bunsen) es conveniente homogenizar el medio en el
transcurso de la operación para evitar que el agar sedimente en el fondo del
recipiente y no se distribuya por igual en todas las placas. También es
posible conservar el medio destinado a preparar placas Petri solidificado y
estéril en tubos que se fundirán al baño Maria en el momento de la
preparación de las mismas.
Los caldos y medios sólidos pueden conservarse, una vez esterilizados, a
temperatura ambiente pero para reducir su deshidratación y el consiguiente
cambio en las concentraciones de sus componentes es preferible
conservarlos a 4ºC.
e aqui
Respuesta:
1º nutrentes adecuados disponibles
2º consistencia del medio
3º luz ambiental
4º humedad
5º esterilidad