• Asignatura: Química
  • Autor: Saramanning1
  • hace 5 años

Explica por qué muestras o situaciones es aconsejable y por qué no, del método Chelex.

Respuestas

Respuesta dada por: karenmilagros62
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Chelex 100 es un material quelante de Bio-Rad que se utiliza para purificar otros compuestos mediante intercambio iónico . Es digno de mención por su capacidad para unir iones de metales de transición .

Es un copolímero de estireno- divinilbenceno que contiene grupos de ácido iminodiacético .

Se obtiene una solución concentrada de metales eluyendo la resina con un pequeño volumen de ácido nítrico 2 M , que protona los grupos iminodiacetato.

La resina Chelex se usa a menudo para la extracción de ADN en preparación para la reacción en cadena de la polimerasa al unirse a cationes que incluyen Mg 2+ , que es un cofactor esencial para las ADNasas . Chelex protege la muestra de las ADNasas que podrían permanecer activas después de la ebullición y podrían degradar posteriormente el ADN, haciéndolo inadecuado para la PCR. Después de hervir, la preparación de Chelex-DNA es estable y se puede almacenar a 4 ° C durante 3-4 meses. Las perlas de resina polar se unen a los componentes celulares polares después de romper las células abiertas, mientras que el ADN y el ARN permanecen en solución acuosa por encima de la resina Chelex.

Sin embargo, los pasos de calentamiento desnaturalizan la doble hélice y el ADN monocatenario resultante es menos estable en almacenamiento

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