Question

¿Qué diferencia existe entre el plásmido quimera y el plásmido inicial?

Answer 1

Los plásmidos son moléculas de ADN extracromosómico circular que se replican y transmiten independientes del ADN cromosómico. Están presentes normalmente en bacterias, y en algunas ocasiones en organismos eucariotas como las levaduras. Su tamaño varía desde 3 a 10 kb. El número de plásmidos puede variar, dependiendo de su tipo, desde una sola copia hasta algunos cientos por célula. Los vectores plasmídicos permiten clonar ligandos de DNA exógeno de hasta 4 kb ya que un tamaño mayor a éste dificulta la clonación en estos vectores. El término plásmido fue presentado por primera vez por el biólogo molecular norteamericano Joshua Lederberg en 1952.

El ADN recombinante es un fragmento de ADN construido de forma artificial con segmentos no homólogos que pueden proceder de otros organismos. Las encargadas de cortar por lugares específicos el ADN son los enzimas de restricción, estas son endonucleasas que fragmentan el ADN siempre en secuencias conocidas ó palíndromos (capicúas). Cortan las dos hebras pero dejan colas de una sóla hebra que servirán para la unión.
El fragmento cortado puede contener un gen interesante que vamos a incorporar al ADN de otro organismo. Para ello es necesario un vector ( plásmido ó virus). Para construir un ADN recombinante se somete el ADN del vector y el ADN del plásmido a la acción de un enzima de restricción; los extremos ó lugares de corte son cohesivos ó pegajosos ya que se unen fácilmente al ser sus secuencias complementarias. Se forma un plásmido quimera.

El plásmido puede duplicarse en la bacteria y se produce la clonación del fragmento. Si el fragmento cortado contiene un gen interesante, este se expresa en la bacteria y se obtiene el producto deseado. Como la bacteria se multiplica a gran velocidad, la cantidad de producto pronto será suficiente.