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RespuDr. Henry «Indiana» Jones, Jr. (Harrison Ford). Tras un período de 19 años después de su última aventura, el profesor Henry Jones nuevamente se ve en la necesidad de aventurarse. Esta ocasión tendrá que enfrentarse contra misteriosos agentes con poderes sobrenaturales pertenecientes a la Unión Soviética, que están buscando la localización del cráneo de cristal. Con tal de prepararse para su retorno como Indiana Jones, a los 64 años de edad, Harrison Ford estuvo hasta tres horas diarias en un gimnasio y se sometió a una dieta alimenticia, basada en el consumo de un alto contenido de proteínas.8 Durante el rodaje, decidió realizar la mayor parte de las acrobacias del personaje. Respecto a ello, mencionó: —El principal recurso de Indiana Jones no es su juventud, sino su imaginación e ingenio. Tal vez su físico constituye parte indispensable, sobre todo por su agilidad para salir de situaciones en las que se ve involucrado. Sin embargo, los golpes y las caídas de personas desde lugares elevados no lo son todo en una película de aventuras. Mi ambición es, de hecho, lograr hacer que el público mire hacia el verdadero rostro del personaje y no a la silueta de un doble. Así que espero que no existan rumores negativos sobre mi edad en este momento.9
Henry «Mutt Williams» Jones III (Shia LaBeouf). El joven hijo de Indy en su nueva aventura.10 El personaje de Shia LaBeouf es el de un motociclista que acompaña a Indy en su nueva aventura.11 El productor, Frank Marshall dijo que este personaje añade el humor necesario para el desarrollo de la historia, principalmente por su arrogancia juvenil contrastante a la del viejo y sabio Indy.12 Al momento de ser elegido para participar en la nueva película de Indiana Jones, LaBeouf se emocionó tanto que firmó sin enterarse de cuál personaje le había sido asignado.13 Antes de comenzar la producción, subió 15 kilos de peso para su personaje,14 y miró las películas previas en la serie, además de Blackboard Jungle, con la finalidad de inspirarse para su próximo personaje.15
George «Mac» McHale (Ray Winstone). Posee una doble personalidad dentro del argumento: como aliado de Indiana, así como su rival, resultó de una combinación entre los personajes de Sallah y René Belloq —amigo y enemigo de Indiana Jones, respectivamente, en la primera película de la serie—.16 De acuerdo a las declaraciones de Winstone, Mac trabajó con Indy, durante la Segunda Guerra Mundial, en la AFI. Durante esa época, existía la sospecha de un posible espionaje encabezado por Rusia en el gobierno británico.17 Spielberg sintió que Winstone era "uno de los actores más brillantes en el mundo", después de ver Sexy Beast.17
Irina Spalko (Cate Blanchett). Una de las agentes soviéticas que quiere obligarlo a buscar la calavera de cristal. Marshall mencionó que Irina Spalko es el personaje que, acorde a la tradición de la serie, inicia una relación amorosa con Indiana.18 Cate Blanchett siempre había querido interpretar al antagonista principal de alguna película, por lo que Spielberg la eligió para ser la villana de la nueva película de Indiana Jones.19 Una de las razones principales para su selección fue la similitud entre el personaje y ella. Aunado a ello, se encuentra la previa participación de Blanchett en diversas películas con personajes diferentes.20
Marion Ravenwood (Karen Allen). Amante de Indy y compañera en la misión de la búsqueda del Arca de la Alianza, descrita en la primera película de la serie. El personaje de Marion Ravenwood no había sido confirmado para la nueva película de la serie. Spielberg invitó a Karen Allen, a principios de 2007, para participar con su personaje previo de la primera película de Indiana Jones. —¡Ha sido anunciado! ¡Haremos Indiana Jones 4 y tú estás dentro del elenco, le dijo textualmente Spielberg a Allen, al momento de su invitación.21
Profesor Harold Oxley (John Hurt). Compañero de Jones que desapareció en 1937, mientras se encontraba buscando los cráneos de cristal.17
Decano Charles Stanforth (Jim Broadbent). Compañero de Jones en la Universidad Yale.
Coronel Dovchenko (Igor Jijikine). Coronel ruso.
General Ross (Alan Dale). Amigo de Indy que lo ayuda a escapar en la película.
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