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Principales
Doña Bárbara: Representa la barbaridad del llano, es todo lo contrario a Santos Luzardo; ella es arbitraria, violenta, astuta y caprichosa, lo que le valió los apodos de "la dañera" o "la devoradora de hombres". Sin embargo, todavía en ella no hay una ausencia absoluta de sentimientos, que son despertados intensamente por Santos Luzardo. Sus maneras contradictorias son producto de su herencia mestiza y reflejan el comportamiento salvaje de su ambiente. Su comportamiento es una reacción al trauma que ella sufrió en su niñez, víctima de una violación.
Santos Luzardo: Representa la civilización y el progreso. Él es un hombre del llano civilizado por la ciudad, y al mismo tiempo, abogado y doctor graduado de la Universidad Central de Venezuela. Luzardo es un hombre con gran profundidad psicológica y en esencia es buena persona. Se propone instaurar el orden que la tiranía de Doña Bárbara había instaurado en las tierras del Llano. Se resiste a los amores de "la devoradora de hombres" y se enamora de Marisela, a la que había educado.
Marisela: Hija de Doña Bárbara y de Lorenzo Barquero,fue abandonada por su madre a su propia suerte, es fiera razón por la que andaba sucia y desgreñada. Después, gracias a Santos, se convirtió en una persona diferente. En el momento en que Santos Luzardo decide hacerse cargo de ella descubrimos a una Marisela renovada, a una Marisela bella, tierna, traviesa y de rápido aprendizaje. Marisela simboliza definitivamente la evolución, un cambio de lo salvaje y primitivo al progreso.
Secundarios
Lorenzo Barquero: Hijo menor de su familia. Joven con mucho futuro por delante, que al morir su padre se ve obligado a regresar al llano en donde su voluntad es destruida por la desgracia y el vicio.
Juan Primito: Representa la superstición y la creencia pagana de los hombres del llano. Jefe de Doña Bárbara, enamorado de Marisela.
Guillermo Danger: llamado también «Míster Danger». Proviene de Alaska y representa el desprecio de los extranjeros hacia los venezolanos. Es cómplice de Doña Bárbara. Tiene un humor negro y despiadado, es musculoso, de ojos claros, piel rojiza y cabello rubio.
Ño Pernalete: Es el Jefe de la Gobernación Civil. Representa, en unión con «Mujiquita», la incompetencia política del país y el decadente estado de derecho, al mismo tiempo representa el estado deprimente de la sociedad, causada por los líderes políticos de la época. Se opone a que cualquier gestión de la justicia se haga al margen de su supervisión o al margen de las normas no escritas del caciquismo. Tendrá un par de enfrentamientos con Santos Luzardo, abogado de profesión, por esa misma razón.
Balbino Paiba: junto a Melquiades Gamarra ayudan a Doña Bárbara a matar a los hombres que Bárbara mandaba a matar sin necesidad que esta les pagara.
Antonio Sandoval, Juan Palacios «Pajarote».
Carmelito López, María Nieves: Son los peones de la hacienda Altamira. Son compañeros y ayudan a Santos.
Don Encarnación: Padre de Lucía (esposa de Antonio)
Félix Luzardo: Hijo primogénito de don José Luzardo y doña Asunción, él es asesinado por su propio padre.
Venancio: Hijo de Don Venancio, Venancio es el amansador.
Mujiquita: Amigo de Santos, Mujiquita trabaja en la jefatura civil.3
Melquiades Gamarra:(el brujeador) espaldero de doña Barbara. Era el que cometía los crímenes por ella, era el espanto de la sabana porque en las noches no dejaba a los caballos en paz para que fueran a los corrales equivocados y tuvieran relaciones.
Explicación: