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Las enzimas de restricción, también conocidas como endonucleasas de restriccción, son enzimas que reconocen una secuencia de nucleótidos en el DNA y la cortan en ese punto.
El sitio donde cortan se le conoce como diana o sitio de restricción.
Estas enzimas son aisladas de bacterias y son herramientas muy útiles en ingeniería genética, pues gracias a ellas, es posible aislar un segmento de DNA de interés e insertarlo en otro para que exprese ciertas características, así es posible mejorar la genética de vegetales y plantas, la obtención de bioinsecticidas, la obtención de plantas y animales transgénicos y las terapias génicas
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